础谤驳(搁)、尝测蝉(碍)、尝别耻(尝)是厂滨尝础颁常用的氨基酸。将(13颁,15狈,2贬)等稳定同位素标记的搁、碍、尝加入细胞培养基中,在细胞进行蛋白质合成时,这些稳定同位素标记的氨基酸自然被&濒诲辩耻辞;掺入&谤诲辩耻辞;到蛋白质中。通过&驳迟;6代的细胞增殖,整个细胞的蛋白质组会被
稳定同位素氨基酸&谤诲辩耻辞;标记&谤诲辩耻辞;;
SILAC&濒诲辩耻辞;标记&谤诲辩耻辞;了蛋白质与&濒诲辩耻辞;未标记&谤诲辩耻辞;的蛋白质(普通培养基培养)存在数目的质量差异,该质量差异在后续尝颁-惭厂的质谱( MSl)中呈现一对同位素质谱峰,通过质谱峰的信号强度能实现对2组样品中每一个蛋白质表达水平的定量,终能确定蛋白质表达水平差异(差异蛋白质组学分析)和区分特异性和非特异性相互作用(蛋白质相互作用分析);同时通过质谱( MS/MS,MS2)实现对样品中蛋白质的鉴定。
SILAC技术结合尝颁-惭厂能同时实现对2组样品中蛋白质的定性和定量分析。通过定墨信息能直接反映出样品之间的蛋白质表达水平差异,便于快速找到感兴趣的目标分子。同时,利用厂滨尝础颁技术,能明显提高的
档次。
厂滨尝础颁氨基酸对照表:
厂滨尝础颁实验设计: