免疫共沉淀实验
当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在argarose beads上的蛋白质A的抗体免疫沉淀A蛋白，那么与A蛋白在体内结合的蛋白质B也能一起沉淀下来。再通过蛋白变性分离，对B蛋白进行检测，进而证明两者间的相互作用。
免疫共沉淀实验（Co-Immunoprecipitation, Co-IP）是一种经典的生物化学技术，用于研究蛋白质之间的相互作用。其原理主要基于抗体和抗原之间的专一性结合作用。以下是对免疫共沉淀原理的详细解释：
一、基本原理
?抗体与抗原的专一性结合?：免疫共沉淀利用抗体能够特异性地识别并结合其对应抗原的特性。这种专一性结合是免疫共沉淀技术的基础。
?细胞裂解?：首先，细胞需要在非变性条件下被裂解，以保留细胞内蛋白质之间的相互作用。这样，原本在细胞内相互结合的蛋白质在裂解后仍然保持结合状态。
?抗体与靶蛋白的结合?：将特异性的抗体加入到细胞裂解液中，抗体将与裂解液中的靶蛋白（即已知或待研究的蛋白质）形成抗原-抗体复合物。
?复合物沉淀?：如果系统中存在与靶蛋白相互作用的蛋白质（称为结合蛋白），这些结合蛋白也会与靶蛋白-抗体复合物结合，形成更大的蛋白质复合物。随后，通过离心或其他物理方法，可以将这些复合物沉淀下来。
二、实验步骤（简要）
?细胞裂解?：在非变性条件下裂解细胞，获取细胞裂解液。
?抗体结合?：在细胞裂解液中加入特异性的抗体，使抗体与靶蛋白结合形成复合物。
?沉淀复合物?：通过离心或其他方法将蛋白质复合物沉淀下来。
?洗脱与分析?：对沉淀物进行洗脱，去除非特异性结合的杂质，然后进行SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳）及Western blotting等分析，以确定与靶蛋白相互作用的蛋白质。
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